1.陰性對照和陽性對照都出現(xiàn)陽性擴增帶

　　原因：

　?、訇幮詷悠泛蚉CR反應(yīng)試驗污染。

　?、陔娪旧蠘訒r避免PCR產(chǎn)物漂移到其他孔而影響結(jié)果判定。

　　解決方法：

　　①更換全部試劑，必要時更換所有移液器。

　?、趹?yīng)小心操作，或瓊脂糖凝膠加厚，增加每孔的容量，可避免加樣液的溢出。

　　2.陽性對照呈陰性

　　原因：

　　①陽性樣品或加入陽性模板失效。無論是組織還是血清，凍融1次后病原數(shù)量明顯減少。

　?、诩尤朐噭┝坎粶蚀_或遺忘了某一成分。

　　解決方法：

　　①將陽性對照樣品分成小包裝。每個包裝夠用1次好。

　?、谧屑毢藢υ囼炗涗洠σ埔浩?。

　　3.出現(xiàn)非特異擴增帶

　　原因：

　　①樣品模板量過多。

　?、谝锘騎aqDNA聚合酶多。

　?、坻V離子濃度過高或退火溫度過低。

　　解決方法：

　　依據(jù)熒光定量PCR儀具體實驗的情況，分析上述可能出現(xiàn)的原因，采取相應(yīng)的措施。

　　4.陽性對照擴增帶弱

　　原因：

　?、匐娪緯r瓊脂糖中EB含量少或長時間后再用已失效。

　　②擴增效率不高。

　　解決方法：

　　①是將瓊脂糖凝膠放入含有EB電泳液中再染30 min后再觀察。

　?、跈z測儀器是否正常工作。

　　③增加純化DNA或cDNA樣品的稀釋倍數(shù)。